服務內容
1. 溫和條件下進行蛋白抽提,BCA定量,調整蛋白濃度
2. 樣品預處理:用Protein A/G Sepharose孵育
3. 樣品與IP抗體進行孵育
4. 洗滌Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex,并對免疫復合物進行變性處理
5. 沉淀產物SDS-PAGE或者WB鑒定(目前暫不提供別的鑒定)
6. Western blot檢測
(1) 電泳:聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)分離蛋白樣品
(2) 濕法轉?。˙LOTING:Tank Transfer)
(3) 雜交:用抗體鑒定膜上的特定蛋白(INCUBATION: Antibody)
(4) 化學發光檢測(ECL),膠片曝光,TotalLab Quant軟件讀取IOD值(可選)
樣品要求(樣品處理及保存見附件)
1. 細胞>1×107;組織>30mg;細菌濕重>50mg;植物>100mg;血清>50ul
2. 樣品蛋白濃度>1mg/ml,蛋白量>500ug/樣品
收費標準
服務項目 |
收費標準¥ |
實驗周期 |
免疫沉淀 |
7500/基因 |
3-4周 |
免疫沉淀+可曝光marker |
7800/基因 |
3-4周 |
ImageQuant TL讀取條帶IOD值及計算 |
詢 價! |
客戶提供材料
1、 新鮮或正確保存的樣品
2、 目的蛋白一抗
3、 陽性對照樣品(盡量提供)
4、 相關文獻(可選)
提交給客戶結果
1、預實驗曝光結果(膠片及掃描圖),預實驗采取2個一抗稀釋度
2、正式實驗曝光結果(膠片及掃描圖)
3、完整實驗報告
4、IOD值分析報告(可選)
5、抗體是否可以適用于IP是進行ChIP的前提
服務說明
1. 待檢測樣品可以是待檢測蛋白樣品,也可以是細胞、組織等其他樣品;
2. 免疫沉淀用抗體;
3. 檢測用普通抗體;
4. 特異性二抗由北京啟研生物科技有限責任公司提供;
5. IP檢測可以不進行,但是不能保證后續實驗的結果。
對照設置
1、 空白:無抗體,只有protein A/G
2、 陰性對照:無蛋白,有抗體及protein A/G
3、 陰性對照:未轉染細胞或者基因敲除樣品
4、 無關空白抗體
5、蛋白裂解液上清:Input。